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Nuclear and Cytoplasmic RNA purification
Nuclear and Cytoplasmic RNA purification
產品介紹
Norgen公司這套 ”細胞質和細胞核RNA純化套組” 提供了快
速的純化細胞質和細胞核Total RNA的方法,而純化的過程不僅
快速,最快僅需45分鐘,並且純化出來的是所有片段的RNA,
包含了大片段的mRNA、rRNA以及小至miRNA、siRNA都可以純
化出來(fig. 1)。因為實驗的不同需求,所以如果能將Total RNA進
一步分離出細胞質和細胞核RNA,那麼這將是非常有幫助的
例如某些研究是針對成熟(細胞質)RNA的表現分析,有些則是針
對細胞核內的RNA的表現量的研究。而使用”細胞質和細胞核
RNA純化套組”純化出的高品質RNA可以使用在許多下游相關實
驗分析(如RT-PCR, Q-PCR, Northern blotting等…)。
”細胞質和細胞核RNA純化套組”也是市面上唯一不使用
”phenol”或”chloroform”等具傷害性化學物品方式的套組。故這樣
的純化方式可以提供非常顯著的優點,像是更容易更快速的純化
過程和高回收率的純化,並且非phenol的純化方式在PCR放大過
程中不會有殘留phenol導致抑制的效果。而純化出的RNA還可應
用在需要避免有DNA結合RNA的下游相關實驗,在細胞質部份
分離出的RNA是不包含有genomic DNA的干擾(fig.2)。
方法
Norgen的Total RNA 純化套組
為分離和純化RNA提供了快速簡
便的方法,純化利用離心並使用
Norgen專利的樹脂來分離。首先
先將細胞或組織加入提供的裂解
液,接著經由離心將裂解物分為
上清液和團塊,上清液中包含細
胞質RNA,而團塊的部份則包含
細胞核RNA,接著分別加入結合
液和酒精後,一同加至管柱內離
心,此時只有RNA會結合在樹
脂上(BIND1 and BIND2),而其他蛋白將會流出或是結合
在上層的樹脂上而被分開,接著結合上樹脂的RNA經過
流洗後去除雜質(WASH1 and WASH2),最後樹脂利用50
µL 的水溶解出後(ELUTE)即可得到高品質的Total RNA(包
含micro RNA)。
2011-04-27 09:50:38